首先來(lái)跟大家普及一下什么叫預(yù)制膠。
預(yù)制膠，顧名思義，就是廠家預(yù)先制備好的凝膠。預(yù)制膠的好處在于，打開(kāi)包裝就能用，點(diǎn)上樣本就能跑，可以大大加快了實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，同時(shí)也讓您遠(yuǎn)離繁瑣的操作和有毒的試劑，不再為漏膠等問(wèn)題而煩惱。
 
預(yù)制膠給很多科研人員帶來(lái)更佳的體驗(yàn)感受，原因在于：預(yù)制膠的成分更均一，批間差異小，最終的數(shù)據(jù)將體現(xiàn)出更高的一致性和重復(fù)性；同時(shí)，與手動(dòng)灌膠相比，預(yù)制膠分離的蛋白條帶更加銳利，分辨率也更高，能夠獲得更漂亮的電泳結(jié)果。預(yù)制膠還有一個(gè)優(yōu)勢(shì)在于，保質(zhì)期長(zhǎng)。自制的凝膠大約只能保存一周，而預(yù)制膠能保存數(shù)個(gè)月，甚至一年。
 
如今，越來(lái)越多的研究人員開(kāi)始使用非變性凝膠。與變性凝膠相比，不含SDS的非變性凝膠體系在分離蛋白的同時(shí)，能夠保留其天然的結(jié)構(gòu)，從而可用于蛋白質(zhì)之間相互作用的研究，以及蛋白質(zhì)復(fù)合物的分離和分析。
 
NativePAGE Bis-Tris非變性蛋白預(yù)制膠它是基于Blue-Native PAGE的原理，讓考馬斯亮藍(lán)G-250附著在蛋白上使其帶有負(fù)電荷，同時(shí)保持蛋白質(zhì)的天然狀態(tài)，不會(huì)使其變性。在上樣前將G-250添加于含有非離子型表面活性劑的蛋白樣本中，可以讓蛋白帶上負(fù)電荷；同時(shí)G-250也會(huì)加于陰極緩沖液中為凝膠提供持續(xù)的G-250供給，傳統(tǒng)的非變性電泳大多采用Tris-甘氨酸系統(tǒng)，其工作pH較高（9.3-9.5），會(huì)對(duì)在高pH條件下敏感的蛋白質(zhì)帶來(lái)不利影響，相比之下，NativePAGE Bis-Tris預(yù)制膠的工作pH接近中性（7.5-7.7），有助于保持蛋白質(zhì)的天然結(jié)構(gòu)和對(duì)高pH值敏感的蛋白質(zhì)的活性。同時(shí)，由于傳統(tǒng)的Tris-甘氨酸非變性電泳系統(tǒng)主要利用工作pH高于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)而使其帶上負(fù)電荷后進(jìn)行電泳，因此不適用于等電點(diǎn)高于電泳工作pH的蛋白質(zhì)。而NativePAGE利用考馬斯亮藍(lán)G-250使蛋白質(zhì)在非變性條件下帶負(fù)電，并在近中性工作pH下進(jìn)行電泳，因此無(wú)需再考慮蛋白的等電點(diǎn)造成的限制。
 
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